Cấu trúc củaống ly tâm siêu lọc
Nắp ống ly tâm, thân ống + bộ lọc (ống siêu lọc bên trong)
Lựa chọn ống ly tâm lọc
1. Xác định xem mẫu cần xử lý có thể sử dụng ống ly tâm siêu lọc hay không theo bảng tương thích hóa học do nhà sản xuất cung cấp. Ống ly tâm siêu lọc thích hợp cho chất lỏng sinh học và dung dịch nước.
2. Chọn thông số công suất của ống ly tâm siêu lọc theo lượng mẫu cần xử lý. Những loại phổ biến là 0.5mL, 4mL và 15mL.
3. Chọn màng lọc dựa trên giới hạn trọng lượng phân tử của mẫu cần xử lý. Khi lựa chọn, chú ý chọn màng lọc có kích thước nhỏ hơn ba lần trở lên so với trọng lượng phân tử chất tan của mẫu để đạt được hiệu quả lưu giữ tốt hơn. Các lựa chọn để cắt trọng lượng phân tử là: 5KD, 10KD, 30KD. ,50KD,100KD.
4. Sau khi xác định các thông số kỹ thuật cần chọn, bạn có thể bắt đầu thử nghiệm.
Sử dụngống ly tâm siêu lọc
Làm sạch trước: Có thể có glycerol hoặc chất bảo vệ trong quá trình sản xuất ống ly tâm siêu lọc, vì vậy hãy loại bỏ chúng trước khi sử dụng bằng cách lọc 15 mL nước khử ion hoặc chất đệm qua màng và lặp lại. Nếu cần rửa thêm, hãy bắt đầu với NaOH 0.05N và lặp lại quy trình. Sau khi bộ lọc ly tâm bị ướt, nó cần được giữ ướt cho đến khi được sử dụng.
1. Mở nắp, chuyển không quá 15 mL mẫu vào giếng mẫu và đóng nắp lại để tránh bay hơi trong quá trình ly tâm.
2. Đặt bộ lọc vào máy ly tâm có thể chứa ống hình nón 50mL. Luôn cân bằng rôto với một bộ lọc ly tâm khác chứa thể tích mẫu bằng nhau.
3. Hãy dành thời gian ly tâm theo yêu cầu. Siêu lọc: Quay ở tốc độ 1,000 đến 5,000 xg, thường trong 20 đến 60 phút, để đạt được nồng độ mong muốn. Nên xác định thời gian quay và trọng lực cho từng ứng dụng.
4. Để thu hồi chất tan đậm đặc, đưa pipet vào đáy thiết bị lọc và hút mẫu lên trong khi lắc mẫu từ bên này sang bên kia để đảm bảo thu hồi hoàn toàn. Dịch siêu lọc có thể được bảo quản trong ống ly tâm.
Lưu ý: Để đạt được độ thu hồi lý tưởng, vui lòng loại bỏ mẫu đã cô đặc ngay sau khi ly tâm.
Phạm vi ứng dụng của ống ly tâm siêu lọc
Một. Cô đặc và khử muối protein và axit nucleic (DNA hoặc RNA)
b. Trao đổi đệm hoặc khử muối của các thành phần sắc ký
c. Thu hoạch các phân tử sinh học từ môi trường nuôi cấy
d. Nồng độ hoặc phân lập virus
đ. Tách thô các hỗn hợp phân tử sinh học
f. Loại bỏ các mảnh vụn và các hạt từ dung dịch tế bào
g. Loại bỏ mồi, chất tiếp hợp hoặc chất đánh dấu phân tử khỏi hỗn hợp phản ứng (thường gặp trong phản ứng PCR)
Tốc độ lọc ống ly tâm siêu lọc
Các yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ lọc bao gồm nồng độ mẫu, thể tích ban đầu, tính chất hóa học của chất tan, lực ly tâm tương đối,
Góc của rôto ly tâm, loại màng lọc, diện tích và nhiệt độ lọc hiệu quả, v.v.
Nói chung, các nhà sản xuất sẽ cung cấp sơ đồ điểm và đường về thời gian ly tâm, thể tích chất lỏng, độ chặn phân tử, v.v. làm tài liệu tham khảo cho quá trình ly tâm. Chúng sẽ được hiển thị riêng biệt theo rôto ngang hoặc rôto góc cố định. Thời gian ly tâm cần thiết có thể được xác định tốt hơn dựa trên bảng dữ liệu. .